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- 1、离子交换柱
离子交换柱
1、离子交换层析在多糖的分离纯化中应用广泛,它根据多糖的性质,常使用阳离子交换剂、阴离子交换剂以及硼砂交换剂。其中,阴离子柱层析是最常用的方法,适用于分离酸性、中性和粘多糖,如DEAE cellulose、DEAE Sephadex(葡聚糖)、DEAE Sepharose(琼脂糖)系列等。
2、离子交换层析: 原理:根据多糖所带电荷的性质,选择合适的离子交换剂进行分离。常用的离子交换剂有DEAE cellulose、DEAE Sephadex、DEAE Sepharose等。 应用:广泛应用于多糖的纯化过程,特别是中性和酸性多糖的分离。例如,DEAE cellulose52作为阴离子交换柱,能有效分离果胶等中性和酸性多糖。
3、阳离子交换柱层析的洗脱顺序包括:酸性洗脱、碱性洗脱、盐洗脱、温度洗脱和溶剂梯度洗脱。酸性洗脱:酸性洗脱是在酸性条件下进行,此时阳离子交换树脂上的阳离子被酸性物质取代,从而使生物分子与树脂解离。这种洗脱方式通常适用于大多数生物分子的阳离子形式被脱附的情况。
4、在阴离子交换柱中,固定相通常是带有正电荷的树脂,它可以吸附带有负电荷的阴离子。当样品溶液通过柱子时,阴离子会被树脂吸附,而流出水中的离子主要是未被吸附的阳离子。因此,阴离子交换柱流出水的电导率远小于阳离子交换柱流出水。
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