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3,5-二硝基水杨酸比色定糖法实验报告
***用蒽酮-硫酸法测定杜仲水提液中总糖含量，3，5-二硝基水杨酸法测定杜仲水提液中单糖含量，多糖含量为总糖与还原糖含量之差。该法简便、快速、准确、稳定，所用材料、过程都不一样。
还原糖的测定方法：3，5-二硝基水杨酸法在波长540nm下，一定浓度范围内，还原糖的量与光吸收值呈线性关系，可利用标准曲线法测定样品中的还原糖含量。
还原糖和总糖的测定 （3，5-二硝基水杨酸比色法） 是实验如下包含实验目的，原理，试剂，材料。实验目的 掌握还原糖和总糖测定的基本原理。学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光 度计的使用 。
显色和比色：取3支25mL刻度试管，编号，分别加入还原糖待测液2mL，35二硝基水杨酸试剂5mL，其余操作均与制作标准曲线相同，测定各管的吸光度。
总糖和还原糖的测定
1、总糖和还原糖的测定方法有滴定法和光谱法。一 、滴定法 样品处 将样品研磨成粉末，用热水溶解，再用蒸馏水定容。
2、还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是 指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。
3、总糖和还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。日常生活遇到的单糖和麦芽糖都叫作还原糖，蔗糖还有淀粉这俩都是非还原糖，他们利用溶解度是不同的。
3,5-二硝基水杨酸比色法测定糖含量是多少?
1、-二硝基水杨酸比色法测定糖含量是糖含量时应乘以0.9，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定。还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3，5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
2、显色和比色：取3支25mL刻度试管，编号，分别加入还原糖待测液2mL，35二硝基水杨酸试剂5mL，其余操作均与制作标准曲线相同，测定各管的吸光度。
3、还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3，5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计。
4、---二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物，在一定范围内，还原糖的量和反应液的颜色强度呈现比例关系，利用比色法可测知样品的含糖量。该方法是半微量测糖法，操作简便，快速，杂质干扰较小。
DNS试剂显色不稳定
1、DNS试剂的成分：酒石酸钾钠12g，溶于50ml蒸馏水中。加热，于热溶液中依次加入3，5一二硝基水杨酸0.03g，NaOH1g，苯酚0.5g，搅拌至溶，冷却后用蒸馏水定容至100ml，贮于棕色瓶中。DNS化学试剂有毒。
2、Ghose法DNS试剂全称是3，5-二硝基水杨酸法，DNS试剂是植物总糖和还原糖检测（硝基水杨酸法）的成分之一，定量检测植物组织样品中的总糖和还原糖的含量。本制品在4℃避光条件下可保存1年。
3、试剂变质：DNS试剂在储存和使用过程中会发生变质。试剂过期或受到不良储存条件的影响，化学物质会发生分解或降解，导致试剂的性质发生变化。试剂污染：DNS试剂在使用前应该保持纯净，避免受到其他化学物质的污染。
4、能用。dns试剂配好后呈黄棕色，有大量沉淀，在暗处放置1-2个星期后沉淀溶解后才能用，放置期间可摇匀几次，加快溶解。DNS试剂是一种可用于物质中还原糖含量测定的试剂。
5、dns显色冷却后颜色变了是糖不够或者DNS加少了。根据查询相关公开信息显示：dns显色冷却后颜色变了DNS溶液与还原糖发生反应，颜色变化过低说明是糖不够或者DNS加少了。且DNS要在100度条件下反应。
3,5-二硝基水杨酸比色法测定糖含量优缺点
1、-二硝基水杨酸比色法测定糖含量优缺点如下：淀粉酶是水解淀粉中的糖苷键的一类酶的总称，按照其水解淀粉的作用方式，可以分成α淀粉酶、β淀粉酶等。α/β是其中最主要的两种，广泛存在于禾谷类的***中。
2、-二硝基水杨酸比色法：优点是直观，可以直观的看到具体的颜色。缺点是操作起来麻烦，需要的材料太多。
3、还原糖在碱性条件下加热可被氧化成糖酸及其它产物，而氧化剂3，5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
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